O que é um teste de imunofixação e para que é utilizado?
O teste de imunofixação também é conhecido como exame de imunofixação, eletroforese de proteínas ou proteinograma. É usado para medir os níveis de diferentes proteínas no sangue e para identificar variações em suas proporções.
O teste de imunofixação separa as proteínas em subgrupos com base em seu peso molecular e carga elétrica. Os subgrupos consistem em albumina, alfa-globulinas, beta-globulinas e gama-globulinas. Medir os subgrupos permite detectar diferentes distúrbios em variações quantitativas e qualitativas.
O teste é feito com uma amostra de sangue. Os riscos da coleta da amostra são aqueles associados à punção, como sangramento local, hematoma devido ao acúmulo de sangue sob a pele e sensação de tontura.
Posteriormente, a amostra é centrifugada, obtendo-se a parte líquida do sangue que não contém células sanguíneas ou fatores de coagulação, denominado soro. Ele é usado para o teste de imunofixação.
Base do teste de imunofixação ou eletroforese
A eletroforese é uma técnica que permite separar subgrupos de proteínas do soro sanguíneo dependendo das suas características físicas (peso molecular e carga elétrica). O soro é colocado em um papel especial e exposto a uma corrente elétrica; isso permite a mobilização de proteínas e o seu agrupamento.
O agrupamento no papel cria faixas, zonas ou padrões separados, que são analisados por métodos químicos. O teste de imunofixação corrige proteínas com anticorpos direcionados e os mancha. Isso é o que cria os padrões separados, nos quais você pode ver picos ou vales, dependendo das concentrações.
Esses padrões de faixas são específicos para diferentes doenças. No entanto, o teste permite uma avaliação qualitativa. Quando a avaliação quantitativa é necessária, ela é realizada com outros testes, como nefelometria e turbidimetria.
Uma amostra de sangue é suficiente para fazer a eletroforese.Separação de subgrupos de proteínas no teste de imunofixação
O grau de separação dependerá da técnica usada no laboratório. A mais comum é o acetato de celulose, que permite a identificação de cinco subgrupos: albumina, alfa-1-globulinas, alfa-2-globulinas, beta-1-globulinas, beta-2-globulinas e gama-globulinas.
Além disso, permite que a relação albumina/globulina seja determinada e as proteínas totais sejam medidas por colorimetria. Os relatórios também podem ser lidos usando um densitômetro.
1. Medição de albumina
A albumina é a proteína com maior proporção no sangue, representando 58-74% das proteínas totais. É sintetizada no fígado e depende na proporção do consumo de proteínas.
O aumento da albumina pode ocorrer devido à desidratação aguda ou em casos de pacientes recebendo nutrição parenteral. Ela pode diminuir em condições em que há aumento da sua destruição ou redução da sua síntese.
Este último fenômeno está associado às seguintes causas:
- Doenças inflamatórias crônicas: artrite reumatóide ou doença inflamatória pélvica.
- Doença hepática: hepatite aguda ou crônica, alcoolismo.
- Enteropatia perdedora de proteínas.
- Doenças nutricionais: desnutrição ou má absorção intestinal.
- Doenças do glomérulo renal: síndrome nefrótica e síndrome nefrítica.
- Edema e ascite.
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2. Medição de alfa-globulinas
No caso da alfa-1-globulina e da alfa-2-globulina, os níveis aumentados estão associados a qualquer evento inflamatório (que pode ser agudo ou crônico). Os níveis diminuídos estão ligados a doenças hepáticas ou desnutrição e má absorção.
3. Medição de beta-globulinas
Níveis aumentados de beta-globulinas estão associados à anemia crônica, especialmente associada à deficiência de ferro, mieloma múltiplo ou hipercolesterolemia. Níveis reduzidos estão relacionados a doenças hepáticas ou ingestão reduzida de proteínas.
4. Medição de gamaglobulinas
As gamaglobulinas são representadas por imunoglobulinas ou anticorpos, predominantemente do tipo G, A, D e E. Fazem parte do sistema imunológico e protegem contra doenças.
O teste de imunofixação pode identificar não apenas a presença de imunoglobulinas, mas também o tipo de imunoglobulina anormal. Sua alteração é chamada de gamopatia.
A principal utilidade do teste de imunofixação é a identificação de imunoglobulinas monoclonais. Estas têm um aparecimento de pico nas faixas, que é chamado de pico M e está associado a diferentes tipos de câncer de células do sangue (mieloma múltiplo e macroglobulinemia de Waldenström).
No caso do aumento monoclonal, ocorre uma superprodução de uma única imunoglobulina que condiciona uma diminuição na proporção das demais que não são afetadas. Em até 60% dos casos, corresponde ao diagnóstico de mieloma múltiplo ou plasmocitoma solitário.
O aumento policlonal de imunoglobulinas pode estar associado a doenças inflamatórias crônicas (lúpus eritematoso sistêmico, artrite reumatoide), doenças autoimunes, diversos tipos de câncer (leucemias e linfomas), sarcoidose e infecções crônicas.
A diminuição das gamaglobulinas ou hipogamaglobulinemia está associada à síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), uso crônico de esteroides, síndrome nefrótica e doenças neoplásicas, como leucemia.
Indicações para o teste de imunofixação
O teste de imunofixação é solicitado em casos de níveis anormais de proteínas totais ou fracionadas. Também pela suspeita de uma condição que afeta a concentração de proteínas sanguíneas ou causa perda delas, como mieloma múltiplo e macroglobulinemia de Waldenstrom. Na presença de proteinúria (perda de proteína na urina), este teste também é necessário.
O teste de imunofixação é útil para o diagnóstico de distúrbios nas proporções das proteínas do sangue e é o primeiro método no momento da suspeita de mieloma múltiplo. É amplamente distribuído e facilmente acessível.
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